大分子物质的水解实验

微生物实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合物，使其能被运输至细胞内。如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖；脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸；蛋白酶水解蛋白质为氮基酸等。

来源：《微生物学实验（第三版）》

来源：丁香实验

操作方法

淀粉水解试验

1. 将固体淀粉培养基溶化后冷至 50℃ 左右，无菌操作制成平板。2. 用记号笔在平板底部划成四部分。3. 将枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌分别在不同的部分划线接种，在平板的反面分别在四部分写上菌名。4. 将平板倒置在 37℃ 温室中培养 24 小时。5. 观察各种细菌的生长情况，将平板打开盖子，滴入少量 Lugol's 碘液于平皿中，轻轻旋转平板，使碘液均匀铺满整个平板。如

油脂水解试验

1. 将溶化的固体油脂培养基冷至 50℃ 左右时，充分振荡，使油脂均匀分布，无菌操作倒入平板，待凝。2. 用记号笔在平板底部划成四部分，分别标上菌名，3. 将枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，钢绿假单胞菌分别用无菌操作划十字接种于平板的相对应部分的中心。4. 将平板倒置，于 37℃ 温箱中培养 24 h。5. 取出平板，观察菌苔颜色，如出现红色斑点，说明脂肪水解，为阳性反应。

明胶水解试验

1. 取三支明胶培养基，用记号笔标明各管接种的菌名。2. 用接种针分别穿剌接种（见图 1）枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌。图1 明胶穿刺液化的形态3. 将接种后的试管置 20℃ 温室中培养 2～5 天。4. 观察明胶液化情况。

石蕊牛奶试验

1. 取两支石蕊牛奶培养基试管，用记号笔标明各管欲接种的菌名。2. 分别接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌。3. 将接种后的试管置中，培养 24～48 h。4. 观察培养基颜色变化。石蕊在酸性条件下为粉红色，碱性条件下为紫色，而被还原时为白色。

尿素试验

1. 取两支尿素培养基斜面试管，用记号笔标明各管欲接种的菌名。2. 分別接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌。3. 将接种后的试管置 35℃ 中，培养 24～48 h。4. 观察培养基颜色变化。尿素酶存在时为红色，无尿素酶时应为黄色。