原理
淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖的过程可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实:淀粉遇碘液会产生蓝色,但细菌水解淀粉的区域,用碘测定不再产生蓝色,表明细菌产生淀粉酶酶。
材料与仪器
枯草芽孢杆菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)
固体淀粉培养基 革兰氏染色用卢戈氏碘液(Lugol's iodine solution)
无菌平皿 接种环和接种针
固体淀粉培养基 革兰氏染色用卢戈氏碘液(Lugol's iodine solution)
无菌平皿 接种环和接种针
步骤
1. 将固体淀粉培养基溶化后冷至 50℃ 左右,无菌操作制成平板。
2. 用记号笔在平板底部划成四部分。
3. 将枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌分别在不同的部分划线接种,在平板的反面分别在四部分写上菌名。
4. 将平板倒置在 37℃ 温室中培养 24 小时。
5. 观察各种细菌的生长情况,将平板打开盖子,滴入少量 Lugol's 碘液于平皿中,轻轻旋转平板,使碘液均匀铺满整个平板。
如菌苔周围出现无色透明圈,说明淀粉已被水解,为阳性,透明圈的大小可初步判断该菌水解淀粉能力的强弱,即产生胞外淀粉酶活力的高低。
来源:丁香实验