雄性小鼠生育力检测实验

雄性生殖系统发育分析实验，分析指标有体重、睾丸、附睾、精囊腺、前列腺（图 8-6-6）。

交配生育实验的基本过程可分为如下几步：A 12 周龄实验组和对照组雄性小鼠各 12 只，按照 ♂ : ♀ ＝ 1 : 2 配生育力检测笼，雌性小鼠选用 8～10 周龄 C57BL／6J 品系小鼠。B 合笼后，每天早上 10 点钟之前到动物房，检测雄性小鼠所配雌性小鼠阴道内是否有阴道栓，以验证是否有交配行为。记录见栓情况，包括合笼几天见栓，以及阴道栓的颜色和大小。见栓后，将雌性小鼠编号取出，18 天

附睾精子评估实验包括：① 血细胞计数板计数整个附睾的精子数目；② 附睾精子涂片；③ CASA 仪器检测附睾尾部精子的各项运动指标；④ CTC 精子染色。

睾丸组织形态学检测主要包括 HE 染色观察精子发生状况和 Johnson 评分评价睾丸切片精子发生情况。

流式细胞仪检测睾丸细胞悬液 DNA 含量的基本过程如下：1、首先制备睾丸组织单细胞悬液：移开睾丸白膜，剪碎输精小管，用含有 0.5％ 胶原酶的 PBS 在 37 ℃ 恒温水浴箱中孵育 15 分钟以释放睾丸细胞。2、轻轻吸取剪碎的组织，PBS 洗涤细胞，800 g 离心沉降 10 分钟。用含 1.0 μg/mL 胰蛋白酶的 PBS 重新悬浮细胞。37 ℃ 再次孵育 15 分钟。3、加入同体积的胰酶大

血清激素检测实验的基本过程可分为如下几步： A 准备 12 周雄性实验组和对照组小鼠各 12 只。 B 实施胸骨正中线切开术，心脏穿刺取血 1 mL。 C 以 3000 g 转速低温离心 15 分钟后，收集上层血清并储存于 -20 ℃ 冰箱以备用。 D 用 ELISA 试剂盒（Assay Designs Inc．，Ann Arbor，MI；Amersham Biosciences，Bucks，U.