简介
睾丸组织形态学检测主要包括 HE 染色观察精子发生状况和 Johnson 评分评价睾丸切片精子发生情况。
材料与仪器
器材:
① 石蜡包埋机
② HE 染色体系。
试剂:
① Bouin 液。
步骤
睾丸组织形态学检测实验的基本过程可分为如下几步:
A 新鲜分离出成年雄性 12 周龄实验组和对照组小鼠的睾丸组织,Bouin 液固定 24 小时。
B 常规上行梯度乙醇脱水、石蜡包埋,切取厚度为 5 μm 的组织切片。
C 常规 HE 染色,首先观察雄性小鼠精子发生状况,利用 Johnson 评分评价睾丸切片精子发生情况,评分标准如下:
1 分,曲细精管内无细胞
2 分,仅有支持细胞
3 分,仅有精原细胞
4 分,5 个精母细胞/曲细精管
5 分,许多精母细胞
6 分,5 个精细胞/曲细精管
7 分,许多精细胞,但无分化
8 分,有晚期精细胞
9 分,5 个精子/曲细精管
10 分,许多精子
D 实验完毕后,用 SPSS13.0 软件分析实验结果。
此外,需要仔细观察 HE 睾丸组织切片以发现异常的精子发生情况。附正常的睾丸组织 HE 精子发生切片图(图 8-6-9)。
注意事项
1 睾丸组织形态学检测一般选用 12 周龄雄性小鼠,实验组和对照组各 12 只。如果需要观测精子发生的连续性,则需要选择鼠龄为 6 周龄、9 周龄、12 周龄、15 周龄、18 周龄、21 周龄。
来源:丁香实验