动物胚胎冷冻保存技术

实验动物

别名：

Animal embryo cryopreservation

最新修订时间：2022-02-10

简介

动物胚胎冷冻保存技术，是一项采用一定的保护措施在-196 °C 使胚胎停止代谢，再通过特殊的升温程序恢复其代谢能力的技术。用于动物胚胎冷冻保存技术的方法有 4 种，根据速度的不同，可分为动物胚胎冷冻保存技术常规缓慢冷冻法和动物胚胎冷冻保存技术快速冷冻法；根据所用冷冻保护剂的不同，可分为动物胚胎冷冻保存技术一步冷冻法和动物胚胎冷冻保存技术玻璃化法。

原理

动物胚胎冷冻保存技术的基本原理是低温能抑制胚胎内的生化活动、降低胚胎的变质反应速度。

动物胚胎冷冻保存技术玻璃化冷冻法的基本原理是在急速降温的过程中，某些胚胎保存液黏度不断增加，当其黏度达到临界值时最终可以形成非结晶的固态，称为玻璃化状态。玻璃化液中的高浓度渗透性抗冻保护剂可以通过细胞膜渗透，瞬间使细胞内外抗冻保护剂的浓度达到平衡．从而抑制降温过程中细胞内冰晶的生成，长期保存胚胎。

来源：丁香实验团队

操作方法

动物胚胎冷冻保存技术常规缓慢冷冻法

动物胚胎冷冻保存技术常规缓慢冷冻法，是最早建立的胚胎冷冻方法，该方法的优点是脱水完全、细胞内冰晶形成少、缺点是比较费时，且保护剂对胚胎作用时间长、毒性大，并需要专门的程序降温。

动物胚胎冷冻保存技术快速冷冻法

动物胚胎冷冻保存技术快速冷冻法，是常规缓慢冷冻方法的改进，由于快速冷冻过程中细胞在保护剂中平衡时间短，胞内容易造成冰晶的积聚，因此该方法目前应用较少。

动物胚胎冷冻保存技术一步冷冻法

动物胚胎冷冻保存技术一步冷冻法是利用非渗透性的解冻保护剂中和渗透性的冷冻保护剂，如用蔗糖除去甘油。该方法可以在室温进行胚胎脱水而不需要特殊的降温程序，冷冻过程耗时短，解冻后可直接用于移植。

动物胚胎冷冻保存技术玻璃化法

动物胚胎冷冻保存技术玻璃化法是利用某些冷冻剂的物理学特性，通过急速降温使其由液态转化为外形类似玻璃状态的稳定的非晶体化固体状态。