简介
动物胚胎冷冻保存技术常规缓慢冷冻法，是最早建立的胚胎冷冻方法，该方法的优点是脱水完全、细胞内冰晶形成少、缺点是比较费时，且保护剂对胚胎作用时间长、毒性大，并需要专门的程序降温。
材料与仪器
器材：
0.25 mL 细管、冷冻仪、液氮罐。
试剂：
①胚胎;
②甘油 ;
③PBS ;
④PBSS（含 20%NCS 的 PBS）。
步骤
动物胚胎冷冻保存技术常规缓慢冷冻法的基本过程可分为如下几步：
A. 将胚胎依次放入含 0. 7 mol/L 甘油的 PBS 和含 1.4 mol/L 甘油的 PBSS 中，分别平衡 7-10 分钟；
B. 然后将胚胎装入 0.25 mL 细管的中部，并在细管两端加入冷冻液，每端冷冻液和含有胚胎的中间段均用气泡隔开；
C. 将细管放入预先冷却至-7 °C 的冷冻仪中平衡 10 分钟；
D. 待以 0.3 °C/min 的速度降温至-35 °C 后，将细管投入液氮保存。
来源：丁香实验
