引物设计和末端标记实验

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

对 SSCP 解析能力和局限性的系统分析揭示灵敏度和片段长度有显著的相关性。当DNA 长度为 150~200bp 时，突变的检出率最高。本方案应用了高专一性的放射性同位素，并且包含一个纯化步骤用于去除未利用的核苷酸，从而降低了整个反应的放射能量。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

引物设计和末端标记实验

一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂5X 激酶缓冲液0.25mol/LTris-HCl,pH90.05mol/LMgCl20.05mol/L 二硫苏糖醇（DTT)0.25 mg/ml 牛血清白蛋白（BSA)-20°C 储存灭菌重蒸水（ddH20)TE 缓冲液，pH8.010 mmol/LTris-HCl,pH8.01mmol/LEDTA，pH8.02. 酶和酶缓冲液聚核苷酸激酶，10U/ul(Roch