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常用细胞染色实验
常用细胞染色实验
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实验方法
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问
细胞加药培养9天,爆满状态。DAPI染色,细胞核感觉像是出现染色质“外泄”,核变空,核周深着色。想问这种现象有原因?
feixue7758527w
我觉得很有可能是染色剂加的过多了,很多不应该染色的地方都染色了。抗体也要调整一下。
8 回答
580 围观
问
活死细胞染色
来一起探讨
可能是所使用的活死细胞染色剂的选择不对,也可能是荧光物质的浓度过大,还有可能是在样品处理过程中没有对其进行避光。
2 回答
1202 围观
问
流式测ros出现双峰
此用户已注销
双峰就是有的细胞染上染料了,有的没有染上所以双峰
3 回答
9073 围观
问
细胞荧光染色背景很深
麻黄连翘赤小豆
缩小曝光时间就可以让背景变浅,再调整对比度
4 回答
370 围观
问
求助:钛片上培养成骨前体细胞想做活死细胞染色,应该用什么显微镜呢?共聚焦显微镜还是正置荧光显微镜呢?
府宅
可以使用正置荧光显微镜观察细胞情况
3 回答
352 围观
问
流式做完,细胞染色后可以固定吗?
汤姆卜丽波
你想问的是不是流式过程中的固定,一般检测胞内因子,会染色后固定一下。既可以延长它的保存也可以固定位点防止降解。可以固定
4 回答
447 围观
问
AM/PI活死细胞染色红绿荧光重叠问题
哼哼哈哈Yolk
请问你解决了吗,我也遇到了同样的问题,红绿荧光重叠在同一个细胞内
6 回答
9007 围观
问
各位大神!做免疫荧光细胞染色的时候,最终拍照的时候,我们除了保证曝光时间还有光照亮度统一以外,还要统一什么?
balalaLy
看你使用的显微镜有哪些参数是可以调的,反正都要一致。先大概看一下哪组的荧光比较明显,以亮度低的未基准设置一组曝光参数,以亮度高的一组设置一组曝光参数。就是拍两组不同曝光参数的图。
2 回答
1697 围观
问
细胞染色背景应该如何降低
府宅
内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;
3 回答
296 围观
问
小鼠脑部小胶质细胞免疫荧光
bamboopiggy
我看着你这个图可以,你可以参考一下人家文献里的图片,或者是你选的位置改改
3 回答
1311 围观
问
细胞免疫荧光用 4% 多聚甲醛固定,1% BSA 封闭,这两步可以不要吗?省去会有什么影响?
stellaff
“加荧光标记抗鼠抗体(第二抗体)工作液20ul,混匀振荡置4℃/30分钟(时间不能超过)。”请问这步必须是4℃/30分钟吗?时间不能超过,如果超过了会有什么影响?” 二抗不一定就是4℃ 30分钟,我们经常采用室温下避光孵育1小时,这样也可以得到较好的效果。细胞免疫荧光是需要固定的,根据目的蛋白的不同可以选择多聚甲醛或者丙酮,一般固定20分钟。封闭也是需要的 可以减少非特异性背景。
1 回答
1786 围观
问
高尔基染色
Eason老歌迷
你可以看看说明书。一般动物不能灌注,(灌注会造成阴性结果)直接处死取脑,水洗一下,放入1,2混合液,(24小时换液),避光,室温14天。
3 回答
1604 围观
问
请高手帮忙看下小鼠主动脉瓣Masson染色如何计算胶原百分比,图中圈出的部分属于主动脉瓣还是心脏?谢谢🙏
汤姆卜丽波
是心脏啊。下面那部分才是主动脉瓣
2 回答
1334 围观
问
血管masson染色
Eason老歌迷
这个,很明显,出现了轻度损伤。
2 回答
2221 围观
问
免疫荧光和HE染色的冰冻切片
Eason老歌迷
不行,不可以,少了一个步骤,你得固定
3 回答
507 围观
问
小鼠脑HE染色,帮忙寻找黑质在哪里?
你好几和户
黑质确实不太好找,可以尝试以下方法,将小鼠快速断头处死,取出完整脑,将脑至于-80度速冻5min。取出速冻好的鼠脑,至于冰上,切取前囟(在剥离的鼠脑上,前囟和腹侧的视交叉前缘处于同一垂直面上)后,3mm-4mm的冠状切面。在鼠脑切面上,黑质脑区的颜色是与其它脑区颜色不同的,有比较清晰的界限,用镊子挖取即可。
2 回答
2514 围观
问
小鼠肝脏HE染色求助
Eason老歌迷
染色不均匀的话,可能有几个主要原因。一是组织取材固定不当,如组织取材过大或过厚,不能将组织完全固定,组织切片染色后出现外周固定好的部分易着色,而中间未固定好的组织 ,细胞着色模糊,使染色不均。二是切片薄厚不均或有横纹。三是组织脱水,透明和浸蜡处理不当,组织脱水用的各级乙醇未能保证相应浓度使组织脱水不彻底,二甲苯内的时间过长组织易碎也无法切出好片子,浸蜡温度过高,组织变脆也不利切片染色。
3 回答
1518 围观
问
小鼠附睾脂肪的组织染色需要特殊的固定液么?需要做冰切,HE染色。目前是直接放在4%PFA里。有什么固定液配方吗?
dxy_gwrp7ndq
4%多聚甲醛( PFA )的配制方法:1L: PFA 40g0.1M PB ( pH 7.4)先加入500∽800ml,加热至60℃,磁力搅拌使粉末完全溶解,再稀释至1L.* IL 0. 1M PB ( pH 7.4): A : NaH2PO4 .2H2O 2.96362g B : Na2HPO4 .12H2O 28.99476g或Na2HPO4 11
3 回答
1576 围观
问
结肠He染色切片怎么看?怎么进行评分?
dxy_gwrp7ndq
组织切片HE染色评分表如图所见。
4 回答
7276 围观
问
求助!请教!小鼠肺 肾脏HE染色分析!谢谢各位老师!
bamboopiggy
丁香小程序里,我不知道怎么放大你的图,太小了,我看不太清楚,只能说,你造模后,损伤了肺泡上皮细胞,造成了肺大泡,然后加药后可以rescue。至于肾脏,Sham组看着肾组织结构正常;CLP组肾小管上皮肿胀、刷状缘缺失、空泡变性、小管坏死、管型形成(这个是猜的,我看不清楚);加药后肾组织损伤程度rescue了一下
2 回答
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