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膜蛋白的提取以及如何做IP?

相关实验:利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化实验

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独一无二的ID

最近做了一个不溶于水的蛋白,不能用RIPA提取,目前尝试的裂解液中只有尿素裂解液(8M)能将蛋白提取出来做WB。目前怀疑这个蛋白是一种膜蛋白,至少也是一种疏水性的蛋白质。现在的问题是,这种蛋白质要如何做IP??尿素裂解液提出来的蛋白溶液肯定不能做Co-IP,但是其他裂解液又无法将其溶解,有没有大神能解决一下这个问题??在此谢过!!!!

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2 个回答

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dxy_c1z3mp3

有帮助

取决于蛋白特性,具体蛋白具体分析,tween triton sds 尿素,另与之相互作用的蛋白是可溶不可溶都需要考虑,高盐变性是否会影响其蛋白互作结果,另也可以考虑全长中的亲水片段

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慕容过

有帮助

加高盐,使蛋白变性。疏水键打开。有条件试试疏水层析

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