膜蛋白的提取以及如何做IP？

独一无二的ID

2022-07-08

最近做了一个不溶于水的蛋白，不能用RIPA提取，目前尝试的裂解液中只有尿素裂解液（8M）能将蛋白提取出来做WB。目前怀疑这个蛋白是一种膜蛋白，至少也是一种疏水性的蛋白质。现在的问题是，这种蛋白质要如何做IP？？尿素裂解液提出来的蛋白溶液肯定不能做Co-IP，但是其他裂解液又无法将其溶解，有没有大神能解决一下这个问题？？在此谢过！！！！

2 个回答

dxy_c1z3mp3

2022-07-20

有帮助

取决于蛋白特性，具体蛋白具体分析，tween triton sds 尿素，另与之相互作用的蛋白是可溶不可溶都需要考虑，高盐变性是否会影响其蛋白互作结果，另也可以考虑全长中的亲水片段

慕容过

2022-07-18

有帮助

加高盐，使蛋白变性。疏水键打开。有条件试试疏水层析