求大鼠原代嗅鞘细胞的纯化与分离的具体实验步骤需要的试剂

养过，但总是不成功，最想问的问题包括：

1、将其消化为单个细胞的时候最推荐消化多久哇，之前消化半个小时；

2、静止18/36h的后，将上清转移到另一个培养皿中需要离心去上吗？

3、36h后多少培养密度合适？一个10cm的皿大约几个嗅球的细胞？15cm的皿呢？

4、为什么最后细胞是一团一团长的？细胞长不到空白的地方，这种情况是什么原因造成的？