DC细胞的抗原提呈实验步骤？

BMDC细胞（骨髓源性树突状细胞）的抗原提呈步骤如下：

1. 骨髓细胞分离：从小鼠骨髓中分离出BMDC细胞。

2. 培养：将BMDC细胞在培养基中进行培养，以促进其增殖和分化。

3. 处理抗原：将目标抗原加入培养基中，使BMDC细胞摄取抗原。

4. 抗原处理：BMDC细胞内的抗原被降解成小片段，并与MHC分子结合。

5. MHC分子表达：MHC-抗原复合物被转运到BMDC细胞表面，并在细胞膜上表达。

6. 抗原呈递：BMDC细胞通过其突起结构将MHC-抗原复合物呈递给T细胞。

7. T细胞激活：T细胞识别BMDC细胞表面的MHC-抗原复合物，并通过T细胞受体与其结合，从而激活T细胞。

8. 免疫应答：激活的T细胞开始释放细胞因子，引发免疫应答，如促进B细胞产生抗体、激活其他免疫细胞等。

DC细胞鉴定流程

1、准备细胞：取培养的细胞离心（300 g/5min），弃去上清, 加入一定量PBS洗涤一次，弃去上清，弹散细胞，细胞重悬到 undefined10^6~10^6 /ml之间；

2、取100 μl的细胞于EP管或流式管内，分二管染色，第一管Anti-human CD80 FITC, Anti-human CD83 APC， Anti-human CD86 PE-Cy7各加5 μl；第 二管 Anti-human CD14 FITC, Anti-human CD40 PE-Cy7, Anti-human HLA-DR APC 各加5 μl；

3、加入相应的抗体后混匀，建议弹管子，尽量不用枪头直接吹打，室温避光孵育15 min，染色过程中再混匀一次；

4、染色完成后加入1 ml的PBS洗涤细胞，离心300 g/5min；

5、弃去上清，弹散细胞，加入500 μl PBS重悬，上机检测。

DC在抗肿瘤T细胞免疫的启动和维持中起着核心作用。当肿瘤细胞被加工为损伤相关分子模式（DAMPs）后，DC细胞逐渐成熟，并迁移到淋巴结，将癌症抗原加工并加载到HLA-1上，提呈给CD8 + T细胞