Eason老歌迷
是不是你的慢病毒用量没有控制好呢,做一个预实验探究一下最适浓度。另外推荐你看看这篇文章”用于T细胞慢病毒感染的培养基及应用的制作方法”,里面讲的方法比较简单且成功率高。
府宅
T细胞死亡原因:
1.杂质:病毒溶液中残留的杂质蛋白、内毒素及宿主细胞DNA等是造成细胞毒性的主要因素。特别对于某些外源刺激敏感的细胞来说,严重时将导致细胞死亡。这是病毒感染细胞后,状态差异的主要原因。
2.过度感染:外源基因过度表达,会导致目的细胞本身正常新陈代谢失衡。这是有些细胞过感会死亡的主要原因。
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由于慢病毒对该细胞有一定的毒性作用,需要调整并降低感染的MOI值,并且在感染后4小时、8 小时、12 小时对细胞进行观察,若发现细胞状态变差时,则需要立刻对细胞进行换液操作,使用新鲜的完全培养液替换病毒感染培养液。