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首先可将成品JC-1以DMSO配成储存液(1~5mg/ml),储存于-20℃,用时以培养液稀释至10ug/ml终浓度。
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背景很高的话建议多用pbs冲洗几遍。
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下面是一些建议来解决这个问题:
1. 彻底洗涤细胞:在染色过程中,确保对细胞进行充分的洗涤步骤,以去除未结合的染料。使用合适的缓冲液(例如PBS)进行洗涤,可以帮助减少背景染色的出现。
2. 调整染色条件:尝试优化染色条件,包括染料浓度、染色时间和温度。根据JC-1染色的建议,您可以尝试降低染料浓度、缩短染色时间,或在低温条件下进行染色,以减少背景染色的出现。
3. 控制样品处理:确保在处理样品时避免接触空气或外部环境,以减少染料在溶液中的聚集。尽量使用无菌的器具和试剂,并在进行染色时迅速进行操作,以减少背景干扰。
4. 验证染色结果:在观察和分析染色结果时,确保使用适当的筛选和控制。可以设置适当的阴性对照样品(如未染色的细胞),并与实验组进行比较,以确定是否存在真正的背景染色。
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