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软琼脂克隆形成如何观察

相关实验:软琼脂克隆形成实验

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dxy_xvgeufie

  • 求助:软琼脂克隆形成的白色点点是否为这样的呢?
  • 这个是没有染色的,在镜下观察一定要染色吗,如果一定会的话,可否再固定后用0.05%结晶紫染色呢,结晶紫染色是为了在肉眼的情况下拍照好观察所以染色的吗?如何计数,怎么才算是集落呢?在镜下可以观察到黄色的点点,和类似于细胞状态的细胞团,请问哪个才是真正的细胞克隆数呢,大佬有没有图可以参考一下呢
  • 另外取10个视野,100x镜下,我使用的是6孔板,10x物镜下,视野面积为1mm3,六孔板底面积为9.6cm3,那么一旦视野里有1个集落,那么每孔集落数即为undefined960,这样子计算是否正确
  • 非常感谢大家,欢迎大家附图,真的有点辨别不清集落了


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4 个回答

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sswei

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将培养板置于显微镜下计数克隆数,每个细胞集落含50个或大于50个细胞为1个克隆,以公式集落数=n孔中细胞集落数总和/n,克隆形成率=集落数/接种细胞数x100%计算克隆形成率

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dxyc42u

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在镜下观察需要要染色的,固定后用0.05%结晶紫染色,结晶紫染色是为了便于观察

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loveliufudan

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软琼脂克隆形成的白色点点可能是细胞克隆的结果,但无法确定其准确性和性质,因为无染色的观察通常不足以提供详细的细胞信息。染色可以帮助增加对细胞的可视化和辨别能力。使用0.05%结晶紫染色后观察,可以使细胞集落更易于观察和拍照,但具体的染色方法可能因实验目的和样本特性而有所不同。

关于计数和识别细胞集落的问题,通常需要根据实验设计和研究目的来确定。以下是一些常见的方法和指导:

1. 镜下观察:使用显微镜进行观察,注意区分细胞集落和单个细胞。细胞集落通常表现为紧密聚集的细胞群,而单个细胞则是孤立的单元。

2. 染色辅助观察:染色可以帮助更清晰地区分细胞集落和单个细胞。根据实验需要选择适当的染色方法,并遵循染色方案进行处理和观察。

3. 图像分析:使用图像处理软件或计算机辅助分析工具,对图像进行分析和计数。这种方法可以自动识别和计数细胞集落,提高分析的准确性和效率。


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skyye

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图片中肉眼可见的白色点点就算是集落吧,集落的定义是镜下单个细胞团中细胞数大于50个细胞。拍照的话可用多聚甲醛固定后再用结晶紫染色,用相机或者手机拍。我记得当时我计算克隆形成率是用每个孔中的集落数➗种板时每个孔的细胞数量,然后乘以100%,得到克隆形成率,统计时比较每个组的克隆形成率即可

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dxy_xvgeufieuser-title

我拍照啦,是这样的吗,那细胞克隆数是手数吗,还是在显微镜下捏,这些紫色的就算吗,谢谢

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