Sarsae
求助求助!!想请问各位大神,皮肤马松染色苯胺蓝染的很短(10s不到),为什么还会出现肌肉染上蓝色呀
以下是我的protocol :
样本4%多甲固定,蔗糖梯度脱水,包埋冰冻切片7um
铁苏木素7分半
酸性乙醇两遍,然后架片架上水洗30秒
蓝化液3分半,水洗1分钟
丽春红8分钟,过水,弱酸(1%的冰醋酸溶液自配)1分钟
磷钼酸40s
苯胺蓝滴染10s,弱酸2分钟,进酒精
95%乙醇脱10秒一次,无水乙醇7秒两次
二甲苯封闭
同门师姐一样也是冰冻切片,可是她的肌肉确不会被蓝所染,而且她帮我做了一片一样出现了肌肉染蓝情况,已经试过很多条件了,感觉都没法把红蓝对比做的好,各位大神能帮忙看看什么问题吗?
下图是切后直染,个人感觉略发紫:下图是再次用甲醇+冰醋酸固定几秒后的效果(同样也出现肌肉染蓝,但比不固定红蓝颜色都浅):
小芙fu
可以适当延长染色时间,做多次对比实验
loveliufudan
根据你提供的实验步骤,我注意到可能有几个原因导致你的肌肉样本染上蓝色。首先,苯胺蓝染色液浸染的时间很短,只有10秒钟,这可能导致染色效果不均匀。你可以尝试延长染色时间,例如30秒或更长,看看是否能改善结果。
此外,你提到使用了弱酸进行染色后进行酒精处理。弱酸可能会影响染色的结果,你可以尝试省略弱酸步骤,直接将样本放入酒精中处理,看看是否有改善。
另外,不同实验条件和样本处理方式可能会导致染色结果的差异。你的同门师姐可能在某些步骤上使用了与你不同的处理方式,这可能解释了为什么她的肌肉样本没有染上蓝色。你可以与她交流并了解她的具体实验步骤,以便进行比较和进一步改进。
土井挞克树
建议延长水洗时间,降低染料浓度。
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