巴啦啦能量-wy
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转染之前可以饥饿处理12h,这样到时候细胞密度不至于太高
huarenqiang5
主要还是把细胞浓度控制在合适的范围。
loveliufudan
如果转染后48小时的时间点导致3T3-L1细胞密度过高并且可能导致细胞死亡,您可以考虑以下方法来解决这个问题:
1. 调整转染时间点:尝试将转染后的实验时间延迟到适当的时间点,当细胞密度仍处于适宜范围内时进行实验。您可以根据细胞的生长曲线和您的实验需求,选择一个更合适的时间点来进行实验。
2. 调整细胞密度:在转染前,控制细胞的初始密度,以便在48小时后获得适当的细胞密度。根据您的细胞生长特性,可以在转染前将细胞以适当的密度传代或分散。
3. 使用抑制剂:如果您希望在48小时内进行实验,您可以尝试添加适当的细胞增殖抑制剂,如丙酰胆碱酯酶抑制剂(如ISO-1)或阿霉素(AraC),以减缓细胞增殖速度。这样可以在48小时内维持相对较低的细胞密度,减少细胞死亡的可能性。
4. 分批转染:将细胞分成两个或多个转染组,每个组在不同的时间点进行转染。这样可以分散转染后的细胞增殖速度,避免细胞密度过高。