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各位老师好,最近在做双抗体夹心法检测血清中的激素,目前用的独立C线,抗体有梯度,但是有许多异常血清T线偏低,且整体数值相关性仅有八十几。如何去除异常值提高相关性呢?
loveliufudan
T线偏低以及整体相关性较低可能与以下几个因素有关:
抗体质量:确保您使用的抗体具有良好的特异性和亲和力。抗体质量对实验结果影响很大。您可以尝试更换其他厂家的抗体或者用不同批次的抗体进行验证。
试剂稀释:检查您的抗体、標本和其他试剂的稀释比例。确保您使用了合适的稀释比例,并且遵循了试剂生产商的建议。
优化实验条件:例如孵育时间、孵育温度、洗涤次数和洗涤剂的选择等。这些因素可能影响您的实验结果。您可以尝试优化这些条件以获得更好的结果。
检查操作流程:确保您遵循了正确的操作流程,以避免可能的污染或交叉反应。
样本处理:异常血清样本可能因为处理不当、长时间存储或反复冻融等原因导致激素降解。确保血清样本的处理和保存方式合适。
要去除异常值并提高相关性,您可以尝试以下方法:
重新检查所有实验步骤,确保没有遗漏或错误。
对可疑的异常样本重新采集并处理,以排除可能的样本问题。
优化实验条件,如孵育时间、孵育温度、洗涤次数和洗涤剂的选择等。
在统计分析中,您可以尝试使用箱线图(box plot)或其他方法来识别并去除明显的异常值,但请注意,这种方法不能解决实验本身的问题,而只是在数据处理阶段剔除异常值。
毛利小五郎的徒弟
可以去除杂质干扰来提高相关性,在形成固相抗原抗体复合物后建议多次洗涤除去其他未结合物质可以提高检测的相关性
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