成骨细胞茜素红染色

可能原因有以下几点：

茜素红染色液的浓度太高或者染色时间太长，导致非钙盐沉积的部位也被染色，影响染色效果和准确性。

固定液的浓度或者固定时间不足，导致细胞膜不完整，细胞内钙离子外溢，形成非特异性的钙盐沉积。

PBS洗涤液的pH值不合适，导致茜素红与钙离子的复合物不稳定，部分溶解或析出。

染色后未及时观察或保存不当，导致染色效果变差或出现污染。

为了避免这些问题，你可以参考以下几点建议：

根据样品的钙离子含量和染色效果，调整茜素红染色液的浓度和染色时间，一般情况下，茜素红染色液的浓度为0.5%-2%，染色时间为10-30分钟。

使用适当的固定液和固定时间，一般情况下，使用4°C的70%乙醇固定30分钟或室温下固定10分钟即可。

使用pH值为4.1-4.3的PBS洗涤液，每次洗涤5分钟，重复3-5次，直到洗涤液无颜色为止。

染色后尽快观察或拍照记录，并将样品保存在4°C的PBS中，避免阳光直射或污染。

黑色可能是存在杂质，局部杂质聚集得到的结果。