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石蜡免疫荧光

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chendh00

用大鼠脑组织石蜡切片染了CD31的免疫荧光,没染出来,之后发现个别气泡里染出来了。有气泡的地方不是封片剂没封到的地方么?请问为什么反而染出来了?救命,一直染不好!

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3 个回答

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sswei

有帮助

可能存在切片上的石蜡残留,若血清质量不好,里面可能含有纤维蛋白原(正常血清是不含有纤维蛋白原的),一旦沾到组织上,基本洗不掉了,也会增强自发荧光信号等情况。

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loveliufudan

有帮助

可能有以下原因:

气泡内部存在细胞或组织碎片等杂质,这些杂质可能会帮助抗体与靶标相结合,从而导致染色结果出现在气泡中。

染色反应过程中可能存在局部温度变化,例如在某些区域可能会有热点形成,导致抗体与靶标更容易结合。而气泡中可能存在温度更高的区域,从而促进了染色反应。


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土井挞克树

有帮助

染到的地方考虑是非特异性结合导致的,重新孵育染色吧

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