摇曳的妖
研究生毕业论文研究指标,实验小白。因为资费不够(划了个大饼,感觉毕业好难),检验老师说流失检测表达很贵,有别的办法可以检测血小板-CD40L吗?
毛利小五郎的徒弟
检测CD40L需要活化的血小板才可以,需要通过流式检测,而且流式是目前最成熟的,你选用别的方法不容易被审稿人认可
摇曳的妖
是的。谢谢老师回答。
loveliufudan
可以通过使用酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法检测血小板表面CD40L的表达水平。ELISA是一种常用的蛋白质检测方法,可以定量测定目标蛋白的浓度。
对于血小板,可以通过血小板的提取和富集方法来准备样品。然后,您可以使用特定的CD40L抗体作为检测抗体,将其固定在酶标板上,并使用血小板样品进行反应。通过检测酶标板上的信号,您可以确定样品中CD40L的浓度。
除了ELISA,您还可以使用其他方法,例如流式细胞术或免疫组化来检测CD40L的表达水平。这些方法都需要进行一些前期处理和特定试剂的使用,因此需要相应的实验技能和经验。
无论您选择哪种方法,都需要进行正确的实验设计和技术操作,以获得可靠的实验结果。同时,也需要根据实验需求和预算来选择合适的方法和试剂。
摇曳的妖
谢谢老师回答
huarenqiang5
可以用流式细胞仪测定与Annexin V 联结的FITC荧光强度检测。
摇曳的妖
目前还是流失为主,现在想来因为抗体试剂在流失这方面很成熟了,流失这边就不会采用采用荧光,预期是采用识别血小板的抗体,然后再予以活化识别的抗体与检测目标蛋白的抗体对比
sswei
可通过酶联免疫吸附的方法检测。
摇曳的妖
如果流失实在做不下去,就打算改方向用这个方法,这也是提问的初衷。这个方法检测出这个蛋白,但是不单单是血小板上的,其他细胞上的也检测了,本来是打算提取血小板后再予以这个方法检测,成本肯定比流失低,但是涉及到最后审稿人的问题,可能前期还需要验证这个实验方法的可行性,然后才能做我的实验。感谢回答。
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