Aboi
不同的文献中给到的提取血小板的方法都各不相同,由于本课题组前期没有做过相关的实验,所以不知道采纳哪种方法更合适。大致有以下几个问题想请教下园子里面的各位老师。我们做的是动物实验,采血来源于大鼠。
①用于采血的抗凝管有没有特别的要求,文献中用于研究血小板的都是用的枸橼酸钠管,而某些生物公司的技术说抗凝管都可以,比如EDTA就行。 不太理解,是不是不同的实验类型,采血管是否有特别的要求?
②梯度离心步骤各不相同,差别也还挺大的。 有文献里面用到的是枸橼酸纳管采血,然后100 gx10min取上清得到PRP,再用400gx10min获得血小板沉淀。 而我到的生物公司那边给的步骤也是800rpmx10min得到PRP,再3500rpmx10min得到血小板沉淀。 这样一看,二次离心的条件设置差别还挺大的(3000rpm≈1800g的样子)
③文献中得到血小板沉淀后大多用到台式液重悬洗涤,请问台式液重悬的目的是什么? 加不加影响大吗?(没查到目的是为什么)
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台式液在一定程度上可以减少血小板的自活化,血小板比较敏感,最好是用上。
灵枢天问
枸缘酸钠也是为了抗凝,一般的抗凝管都可以的
土井挞克树
抗凝管没有特殊要求,保证血液不凝就可以。
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