我怎么123
在冻融裂解的时候,假如裂解8000万细胞,那么缓冲液需要加多少ml呢?只加1ml裂解出的蛋白浓度会不会过高。我用的是HepG2细胞
毛利小五郎的徒弟
1ml是可以的,蛋白浓度不会太高。
loveliufudan
对于TMT标记的热蛋白组学实验,裂解所需细胞数的多少可以根据实验具体要求和细胞类型来确定。通常情况下,每个样品需要裂解至少数百万甚至千万个细胞以获得足够的蛋白质样品。对于HepG2细胞而言,通常每个点裂解800万至1200万个细胞。
对于缓冲液的添加量,取决于所使用的缓冲液和细胞密度。一般来说,缓冲液的加入量应该足够裂解细胞,同时稀释裂解的蛋白质样品,避免蛋白质浓度过高。对于HepG2细胞的裂解,建议使用一定比例的缓冲液来稀释样品,以避免蛋白质浓度过高。缓冲液的添加量需要根据实验具体情况进行确定,一般建议使用1 ml缓冲液裂解800万至1200万个HepG2细胞。如果需要裂解更多的细胞,则需要相应增加缓冲液的添加量。
需要注意的是,缓冲液的添加量要保证足够稀释裂解出的蛋白质,否则蛋白质浓度过高会影响后续实验的准确性。同时,加入的缓冲液要尽可能保证均匀混合,以获得均一的样品。
sswei
按每500000个细胞20μl裂解缓冲液计算。
huarenqiang5
通常1X10 7 cells加1ml预冷的lysis buffer;4度30mins;
5mg组织加300ul预冷的lysis buffer;4度2hr。
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