THP-1诱导失败无数次，跪求高人指点？

pma的终浓度一般在100ng/l。

PMA终浓度为100ng/mL，将细胞种入六孔板，每孔加入细胞2mL。48小时后显微镜下观察巨噬细胞构建成功。

PMA诱导THP-1步骤：

将处于对数生长期的THP-1细胞离心，用RPMI-1640培养基重悬；

加入PMA，显微镜下细胞计数，调整THP-1细胞密度为undefined10^5/mL；

使PMA终浓度为100ng/mL，将细胞种入六孔板，每孔加入细胞2mL；

48h后，显微镜下观察巨噬细胞构建成功。

单核细胞THP-1用PMA诱导后，由悬浮式生长变成贴壁生长，由圆形变成不规则形态，体积进一步增大，细胞浆疏松，细胞核增大明显，可见大量明显细胞器，胞膜周围可见少量突起。

PMA的最终浓度和处理时间：不同的实验室和实验条件下，PMA的最终浓度和处理时间可能会有所不同。一些文献建议使用25-200ng/mL的PMA处理THP-1细胞，处理时间通常在24-48小时。然而，这些条件也取决于您的实验目的和您的THP-1细胞的特性。您可以参考一些发表在专业期刊上的文章，找到与您实验相关的条件。

是否需要relax：在PMA处理之前，一些实验室建议在无血清培养基中进行静置恢复（resting）期，通常在24小时左右。这样做是为了保证THP-1细胞在处理PMA之前保持健康和稳定，从而提高PMA诱导的效率。但是，是否需要这个步骤取决于您的实验要求和THP-1细胞的状态，您可以在自己的实验中测试一下。

LPS诱导的浓度：LPS（脂多糖）的浓度也是一个非常重要的参数。一些研究表明，LPS的最佳浓度可以在1-10 ng/mL范围内，但实际最佳浓度也取决于您的实验目的和THP-1细胞的响应。您可以根据您的实验进行LPS浓度的优化，并且在实验中保持一定的一致性。

IFN的浓度：如果您在使用IFN来激活THP-1细胞的过程中遇到了问题，您可以考虑优化IFN的浓度和处理时间。一些研究表明，IFN的最佳浓度通常在10-100 ng/mL之间，但这也可能因实验条件而异。您可以尝试在不同的IFN浓度下进行实验，并在实验中保持一定的一致性。