土井挞克树
凋亡率在做流式的时候可以得到,凋亡细胞与活细胞的比值分析
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使用Hoechst/PI双染染色法后,可以通过计算细胞核染色体DNA损伤程度来评估细胞凋亡率。在这种染色法中,Hoechst染料用于标记细胞核整体形态,而PI染料用于标记细胞核内的DNA断裂和损伤区域。通过计算Hoechst和PI染色的重叠区域,可以确定哪些细胞核已经发生了DNA损伤,并且因此被视为已经凋亡。细胞凋亡率可以通过计算已经凋亡的细胞核数与总细胞核数之比来确定。
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荧光显微镜拍摄的荧光图像可以用图像处理软件进行细胞凋亡率的计算。以下是一般的计算方法:
从荧光图像中分离出 Hoechst 核染色和 PI 核染色的两个通道。
选择一个固定的视野,并用图像处理软件计算出该视野中 Hoechst 核染色阳性的细胞数量和 PI 核染色阳性的细胞数量。
根据细胞凋亡的特点,可以将 Hoechst 核染色和 PI 核染色都阳性的细胞认定为凋亡细胞。
计算细胞凋亡率的公式为:细胞凋亡率 = 凋亡细胞数 / 总细胞数 × 100%。
需要注意的是,细胞凋亡率的计算需要进行多个视野的计数,并且需要进行多次实验的重复,以确保结果的可靠性。同时,还需要在计算前进行适当的阈值设置和图像处理,以去除背景噪声和提高计数准确性。
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