核酸分子量、拷贝数计算方法

1A260 吸光度值=ds DNA50mg/ml

=ss DNA33mg/ml

=ss RNA40mg/ml

(OD260) x (dilution factor) x [33 或40或50]/ (1000) = mg/ml

MW = 克/摩尔

1 摩尔= 6.02 x 1023 摩尔分子(拷贝数)

平均分子量:

dsDNA=(碱基数) x (660 道尔顿/碱基)

ssDNA=(碱基数) x (330 道尔顿/碱基)

ssRNA=(碱基数) x (340 道尔顿/碱基)

拷贝数计算公式:

(6.02 x 10的23次拷贝数/摩尔) x (浓度g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml.

例：3000 碱基质粒， 浓度100 ng/ml ， MW = 3000 bp x 660 dalton/bp = 1.98 x 10的6次 daltons，1 mol = 1.98 x 10的6次 g.

(6.02 x 10的23次拷贝数/摩尔) x (1x 10的-7次克/微升) / (1.98 x 10的6次 克/摩尔) = 3 x 10的10次 copies/ml.

oligo’s:(mg/ml) / MW x 10的6次 = mM