原理
结构中含有对氨基苯的磺胺类药物在酸性环境中可与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐。该盐在碱性环境中与酚类化合物（麝香草酚）起偶联反应，形成橙色的偶氮化合物。偶氮化合物颜色的深浅与磺胺药的浓度相关。通过测定其光密度，即可推算出药物浓度。
材料与仪器
家兔
磺胺甲噁唑标准液 磺胺甲噁唑溶液 三氯醋酸溶液 亚硝酸钠溶液 麝香草酚溶液 肝素生理盐水溶液 戊巴比妥钠溶液
722 型分光光度计 普通离心机 婴儿秤 兔手术台 手术器械 离心管 吸量管 注射器 试管架 天平 吸球 玻璃铅笔 纱布 滤纸
磺胺甲噁唑标准液 磺胺甲噁唑溶液 三氯醋酸溶液 亚硝酸钠溶液 麝香草酚溶液 肝素生理盐水溶液 戊巴比妥钠溶液
722 型分光光度计 普通离心机 婴儿秤 兔手术台 手术器械 离心管 吸量管 注射器 试管架 天平 吸球 玻璃铅笔 纱布 滤纸
步骤
一、方法
1. 标记试管：取5 ml 离心管8 支，5 ml 试管16 支，用记号笔分别标记“0”“1”“2”“3”“4”“5”“6”“7”。
1. 标记试管：取5 ml 离心管8 支，5 ml 试管16 支，用记号笔分别标记“0”“1”“2”“3”“4”“5”“6”“7”。
2. 加三氯醋酸：取标记好的离心管，在各管中分别加入75 mg/ml 三氯醋酸溶液3.8 ml。
3. 麻醉固定动物：取健康家兔1只，称重，自耳缘静脉注射30 mg/ml 戊巴比妥钠溶液1 ml/ Kg,麻醉后将兔仰卧固定于手术台上。
4. 药前取血：剪开颈部皮肤，暴露颈外静脉。用1 ml 注射器（先用500 U/ml 肝素生理盐水溶液冲冼），由颈外静脉取血0.2 ml，放入“0”号离心管，混匀。
5. 给药：自耳缘静脉注射100 mg/ml磺胺甲噁唑溶液0.2 ml/ Kg（20 mg / Kg），记时。
6. 给药后取血：于给药1 min、5 min、10 min、15 min 、30 min 、45 min 、60 min同4法取血，分别放入“1”至“7”号离心管中，混匀。
7. 离心：将离心管放入离心套管中，两两配平后，对位放入离心机中，以15 rpm离心5 min，停转后取出离心管。
8. 将上清液从离心管移致对应的5 ml 试管中。
9. 制备标准管：另取一支试管，加入20 μg/ml磺胺甲噁唑标准液1.5 ml。
10. 显色：用2 ml 吸量管分别吸取各管的上清液1.5 ml（应逐管更换吸量管）放入对应的试管中。用1 ml 加液器向各试管（包括标准管）中加入5 mg/ml 亚硝酸钠溶液0.5 ml，混匀后再加入5 mg/ml麝香草酚溶液1 ml，再混匀。
11. 比色：以“0”号试管调零，于525 nm波长处用722 型分光光度计测定“1”至“7”号试管及标准管液的光密度。
二、结果
SMZ药动学参数测定结果
1. 根据下列公式求出各时间（t）的血药浓度，并求出logC。样品管浓度（μg/ml）=样品管光密度/标准管光密度×标准管浓度
2. 以时间为横坐标，浓度为纵坐标，在半对数纸上绘制SMZ的药——时曲线，确定其房室模型。
3. 以logC对t 作直线回归，得方程：logC=a+bt
4. 计算药动学参数K 、C0、t 1/2 、Vd 、CL。公式如下：
C0=log－1 a，K=2.303b
t 1/2= 0.693/K,Vd= X0/ C0（X0为药用量）
CL = Vd·K
注意事项
1. 取血方法也可用颈动脉放血或耳缘动脉取血法。
2. 取血及各种液体的量要准确。
3. 将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。
4. 每加一种试剂后必须立即混匀，所加试剂的次序不得颠倒，否则影响结果。
5. 血药浓度计算也可根据另行做出的标准曲线方程求得。
来源：丁香实验
