请教如何设计实验证明所研究蛋白是1次跨膜还是2次跨膜

你可以使用免疫荧光术进行验证。

利用免疫印迹技术（immunoblotting）：

常见的技术会用一种特定的蛋白抗体来检测细胞膜上的蛋白表达，这是最常见的实验。在实验中，你可以用一种抗体来检测细胞膜上的两种跨膜蛋白的表达，以证明一次跨膜蛋白(hi)被检测到

一种常用的方法是用跨膜蛋白的靶向突变，来证明跨膜位置，例如：

改变预测的跨膜区，例如增加跨膜区的长度或者缩短跨膜区的长度，通过比较活性或者定位差异来证明跨膜位置。

删除预测的跨膜区，如果没有跨膜区，则该蛋白不再具有跨膜活性，可以通过定位或者生物学活性证明。

对跨膜区的残基进行突变，如果突变对其生物学活性有影响，则说明该位置是跨膜区。

这些方法可以帮助确定蛋白的跨膜位置，但是要注意，每种蛋白都是独特的，最好先研究一下相关文献，避免重复工作，同时也可以得到一些有用的提示。