土井挞克树
可以先用特异性核酸酶剪切一下再敲除。
juyue2010
选择tp53多个转录本共有序列,sgRNA位置选择基因近5'端,从文章中查找效果显著的sgRNA
dxyc42u
既然是做 knockout,那一定是要所有的亚型都不能表达。那么既然如此,就是要敲除掉这些亚型共有的区域,而且越前面越好(如果只敲除尾巴,TP53 合成了半个身子,半个身子的 TP53 说不定也能起作用),另外,也不能敲除掉内含子(说是,如果敲掉了,可能会形成进的剪接,就有新的蛋白出现)
huarenqiang5
通过CRISPR 技术构建好的 pTYNE 载体与 pCas9/gRNA1 基因敲除载体共转染 293T 细胞。进行细胞 TP53 基因敲除能敲除更多。
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