质粒提取浓度只有50ng/ml

少用些洗脱液吧，应该和质粒本身没关系

如果是50ng/ml，那浓度太少了，你的质粒有问题，相当于没有

能提出50ng已经不错了，10毫升菌液杂质也会相应增加，内毒素会影响转染效率

可以试一下以下方法：

1、增加收菌次数,相对提高了质粒的量,这样的话裂解液的量可以适当增加；

2、裂解充分,变性和复性按说明应该是不超过5分钟,合理控制时间,一般在3分到4分半的时间都是可以的；

3、过柱子时,吸附的时间尽量长一些,可以在这期间做做其他实验或者吃个饭什么的；

4、如果没有必要,不使用去蛋白液,因为每过一遍柱子,其损耗越大,不过这得根据说明的菌种而定；

4、最后洗脱回收的时候,要单方面提高浓度,就要适当减少洗脱液的量,一般都是回收到40~50 μL的,同时要增加洗脱次数,一般两三次就可以了。

如果以上方法都用遍了还无效,就应该考虑菌种本身的问题,是不是冻融或者传代次数过高,导致质粒本身丢失?质粒本身在大肠杆菌的拷贝数是多少?

最低的一般去到20ng/ul,如果是50ng/ul也还算正常。你这个50ng/ml是写错了吗？或者就是质粒没有转进去。