时光不止0305
小白在路上遇到困难了,最近在扩增一段1500bp左右的条带,25ul体系,用标准株提的核酸(1ul,3ul,5ul-浓度约1ng/ul)有明显的目的条带,但样本提的核酸均无条带。
样本目的基因荧光检测的时候CT值30左右,然后跑普通PCR加了1ul量(大概20ng包含其他物种DNA),样本里其他的物种DNA也会有影响吗?后来又增大了模板量,加了8ul,也无条带。marker正常,加的标准株的PCR产物对照也有条带。扩增的条件都是一样的。
麻烦各位老师指点一下🌹感谢🙏
灵枢天问
你试试用你的样本跑个对照,看看是不是样本有问题
时光不止0305
嗯呢
毛利小五郎的徒弟
个人觉得你加的有点少,提高浓度试一下
时光不止0305
好的,谢谢
bamboopiggy
要确定你的模板的dna确实存在,最好跑个胶看一下,有的时候,测得浓度值可能有问题。
时光不止0305
模板是存在的
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