关于450kd大分子量蛋白求助，内参没问题

无信号勿扰

2022-08-25

关于450kd大分子量蛋白求助，内参没问题，目的蛋白跑不出来？

1.电泳(4-12%梯度胶)，压平60v,30min;分离120v,1h。

2.转膜：genscript机器电转10min

用的是0.22um的pvdf膜

有做过大分子量蛋白的可以告知一下，你们当时做的条件嘛，或者指出一些我做的问题，不胜感激！

bamboopiggy

2022-08-25

有帮助

你跑这么大分子量的蛋白，还是换用0.45um的膜比较好，然后买个跟你分子量差不多的marker，可以看到marker了，再转膜，建议延长一下转膜时间，用marker来指示你是否转过去了。

Eason老歌迷

2022-08-25

有帮助

大分子蛋白，你可以用湿转法转膜，然后转膜时间和电流都可以增加，可能第一次转不上，多试几次。

whilt-shirt

2022-08-25

有帮助

这个分子量太大了，你的转膜时间不够，而且最好用0.45um的膜

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