T清风自来
求助:请问收集细胞提取RNA时,怎么确定收集的量能够提取获得足够的RNA,例如铺在6孔板中的细胞,以每孔细胞为一个单位收集后提取的RNA做PCR能够表达吗?会不会量太少?每孔至少多少细胞时能保证获得足够的RNA?
bamboopiggy
一般一个六厘米皿或六孔板的一个孔就够了。undefined10^5个细胞绝对够
balalaLy
提RNA不是细胞越多越好的,一般用12孔板细胞长满就足够你跑十几个基因了,不熟练或者跑得基因多也可以六孔板,长到70%左右足够跑完所有了。
whilt-shirt
一般如果提取细胞的RNA可以用6孔板或者12.5cm2的培养瓶,大概500000个细胞就能提取PCR用的RNA
秋秋欣欣
六孔板一个孔够的,我一般一个孔测出来有一两百
Eason老歌迷
一般咱们用的都是现成的试剂盒,你只要按照说明书的比例,去添加,基本上都够用。然后你也别贪多,加过多的试剂,Trizol里面含有RNA酶抑制剂的,1ml的Trizol一般最多只能裂解100mg的组织。如果组织过量,Trizol无法完全浸润组织无法完全裂解组织,多余组织内的RNA酶等物质会导致RNA的降解。这是RNA降解的很重要的原因。