为什么要用pH8的Tris水溶液饱和酚?

一、水饱和酚又叫水平衡酚。水饱和酚的PH小于7，一般是PH为5.0左右，通常与异硫氢酸胍一起使用，用于细胞RNA的提取，在酸性环境中，DNA在酚相，RNA在水相。两者就分开了。

二、Tris饱和酚一般PH大于7.8，用于DNA的提取。其中，酚是强的蛋白变性剂，可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。 而Tris的主要作用是防治止酚类氧化，若酚类氧化，则会形成醌（两个苯环），醌含有强自由基，会破坏核酸结构。 同时，由于PH值大于7，在碱性环境中DNA处于水相，RNA处于有机相。从而分离上清，即可得到DNA

由于酚与水有一定的互溶，抽提DNA过程中，不会造成样品中含有DNA的水分被吸收，使得DNA的损失减少为苯酚用水饱和的目的。使用Tris将pH调节为8，是由于在此条件下，DNA比较稳定。在中性或碱性条件下（pH5~7），和DNA相比较，RNA游离到水相更加的容易，因此能够使RNA含量较少的DNA样品获得。

因为酚与水有一定的互溶。苯酚用水饱和的目的是使其抽提DNA过程中,不致吸收样品中含有DNA的水分,减少DNA的损失。用Tris调节至PH为8是因为DNA在此条件下比较稳定