我养的MC3T3，刚开始挺好的。穿过两次代之后，就发生细胞成片脱落，求助

成片脱落，可能是你消化的不匀，局部细胞太多了，你换个皿，少加点细胞试试

你的细胞长的不匀 有可能是传代消化过渡， 一吹打成片细胞掉下来， 细胞连在一起 细胞外基质没有机会重构。所以建议你消化的时候，把胰酶放在37度预热，在37度作用细胞，不要长时间放在超净台里消化。细胞变圆就立刻用热的血清中止。轻柔充分吹打，这是个细心活，有耐心，

细胞瓶不干净也是原因，你是怎么洗的。

如果这都不行， 搞一点胶元蛋白煮一下涂在你的瓶子里

先查查你的血清培养基质量，有没有时间太长

在查查你的培养厢，温度、湿度、CO2浓度，查查文献是不是有特殊的培养条件

1、细胞密度太低了，传代或者冻存密度太低，细胞与细胞之间相互因子不够，必然脱落。

建议：不要忙于传代或者冻存，适当地提高细胞密度试试看。

2、降低消化液密度，估计对细胞损伤较大，影响其贴壁。

3、如果上述方式还不行，在培养瓶底部适当地涂抹胶原，包被过的培养瓶会有助于细胞贴壁。

有时候如果细胞生长过快没有及时传代的话，培养基中会积累大量的细胞代谢产物，会因为营养成分不足和代谢产物堆积导致贴壁细胞脱落死亡。