【求助】TPCK和PD98059在溶解之后发生沉淀的原因?
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大家好,我想请教大家一个问题:今儿上午在实验室将 100mg TPCK和 1mg的 PD98059分别溶于1ml DMSO 溶解之后,将其抽取0.5ml加入到1.5ml的无血清RPMI-1640培养液中,TPCK立马就发生化学反应生成粉红色的混浊物。而PD98059静置几分钟后也变成了黄色的混浊物。但是之前PMA也是同样的方法先溶解于DMSO,再溶解无血清RPMI-1640培养液 中。没有浑浊现象发生。问题:1、为什么?2、如果我都用DMSO做溶剂的话,2ml 培养液培养液六孔板中培养液加50μlDMSO稀释液会不会杀死细胞?
其实不是TPCK发生化学反应了,而是你加入的药物量太多,药物不能溶解在medium里析出来了。一般培养基中DMSO的量要少于千分之一,也就是1ml medium最多1ul,你在2ml medium中加50 ul的data将无法分析。
good luck!
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谢谢你,呵呵,我也后来在想或许是TPCK浓度太高,准备在将其稀释一下,但是PD98059(ERK1/2的阻断剂)呢?它仅是1mgl,量特别少,为什么也会生成沉淀?
也有可能是DMSO浓度过高,medium中的成分析出来了
可能吧,但是我第二次稀释DMSO的浓度只有0.5ml,而培养液确实1.5ml,而且生成的是黄色的絮状物,也不沉底儿。
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