如何检测人的肝脏内免疫活性细胞(调节性T细胞或自然杀伤性T细胞)的数量和功能?

流式的方法应该是可以的 可以通过流式的方法去检测人穿刺的肝脏样本中免疫细胞的活性。先剪碎组织，用0.5mg/ml collagenase IV 消化 37℃ 30min。 消化之后过滤离心，裂红。得到免疫细胞之后就可以计数。 利用流式抗体，可以检测Treg和NK细胞的细胞因子 如TNF-a IFN-gamma等。 但是这些胞内因子的检测需要加刺激计，对细胞数量和活性都有一定的要求

可以啊，现在人的Treg一般可以用CD25+CD127-来做，NK用CD3-CD16+或CD56+，再用GZMB定活性

可以通过流式的方法去检测人穿刺的肝脏样本中免疫细胞的活性。先剪碎组织，用0.5mg/ml collagenase IV 消化 37℃ 30min。消化之后过滤离心，裂红。得到免疫细胞之后就可以计数。利用流式抗体，可以检测Treg和NK细胞的细胞因子 如TNF-a IFN-gamma等。

可以通过流式检测肝脏内Treg和NKT的数量变化，称量肝脏重量，计算单位质量的细胞数变化，另外通过标记表面分子，或者刺激之后检测细胞因子，评估细胞的功能变化

取肝脏组织制备单细胞悬液，通过流式只能检测细胞的数量，细胞的功能还要通过相关试验来考察

需要用Percoll先分离人肝内MNCs，才能在细胞水平真正看到Treg和NKT细胞的数量和杀伤功能。穿刺标本一般较少，难以分离得到足够的细胞，上流式都不一定够，更不用说体外培养了。建议穿刺标本制成单细胞悬液进行测序可通过相应指标侧面反应Treg和NKT的数量和功能。

可以啊，直接用流式进行检测，将肝组织制备成单细胞悬液～再进行调节性T细胞以及NK的细胞相应的marker，Treg:CD4+CD25+Foxp3+NK:CD3-CD16+/CD56+做组织最好添加一下CD45的检测以及死活细胞的排除～

1.取组织。参考一下我们组取肿瘤浸润Nk的办法。首先对组织剪小块，滤网过滤，然后ficoll离心去白膜层，接着磁珠分选获取想要的细胞NK。 2.我觉得可以用流式检测细胞的功能。 3.仅供参考，我也是正在学习。✊

活体穿刺取肝组织组织量会不会太少？ 另外肝组织取出后要进行研磨，并加入淋巴细胞提取液进行提纯，以提高淋巴细胞得率，全程应于冰上操作，避免因操作不当引起的细胞死亡。

确定数量要结合流式和细胞计数板。功能要通过检测相关细胞因子的产生。