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如何检测人的肝脏内免疫活性细胞(调节性T细胞或自然杀伤性T细胞)的数量和功能?

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丁香实验

如何检测人的肝脏内免疫活性细胞(调节性T细胞或自然杀伤性T细胞)的数量和功能?
可以通过肝穿刺取肝组织,来应用流式细胞仪检测数量和功能的变化吗?

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10 个回答

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西柚味的芋圆

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流式的方法应该是可以的 可以通过流式的方法去检测人穿刺的肝脏样本中免疫细胞的活性。先剪碎组织,用0.5mg/ml collagenase IV 消化 37℃ 30min。 消化之后过滤离心,裂红。得到免疫细胞之后就可以计数。 利用流式抗体,可以检测Treg和NK细胞的细胞因子 如TNF-a IFN-gamma等。 但是这些胞内因子的检测需要加刺激计,对细胞数量和活性都有一定的要求
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zgx3876

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可以啊,现在人的Treg一般可以用CD25+CD127-来做,NK用CD3-CD16+或CD56+,再用GZMB定活性
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CXCR3

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可以通过流式的方法去检测人穿刺的肝脏样本中免疫细胞的活性。先剪碎组织,用0.5mg/ml collagenase IV 消化 37℃ 30min。消化之后过滤离心,裂红。得到免疫细胞之后就可以计数。利用流式抗体,可以检测Treg和NK细胞的细胞因子 如TNF-a IFN-gamma等。
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咸水鱼rain

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可以通过流式检测肝脏内Treg和NKT的数量变化,称量肝脏重量,计算单位质量的细胞数变化,另外通过标记表面分子,或者刺激之后检测细胞因子,评估细胞的功能变化
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sk1981521

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取肝脏组织制备单细胞悬液,通过流式只能检测细胞的数量,细胞的功能还要通过相关试验来考察
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txs900416

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需要用Percoll先分离人肝内MNCs,才能在细胞水平真正看到Treg和NKT细胞的数量和杀伤功能。穿刺标本一般较少,难以分离得到足够的细胞,上流式都不一定够,更不用说体外培养了。建议穿刺标本制成单细胞悬液进行测序可通过相应指标侧面反应Treg和NKT的数量和功能。
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peaceful13

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可以啊,直接用流式进行检测,将肝组织制备成单细胞悬液~再进行调节性T细胞以及NK的细胞相应的marker,Treg:CD4+CD25+Foxp3+NK:CD3-CD16+/CD56+做组织最好添加一下CD45的检测以及死活细胞的排除~
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空山流水Hz

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1.取组织。参考一下我们组取肿瘤浸润Nk的办法。首先对组织剪小块,滤网过滤,然后ficoll离心去白膜层,接着磁珠分选获取想要的细胞NK。 2.我觉得可以用流式检测细胞的功能。 3.仅供参考,我也是正在学习。✊
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Timy最爱柠檬水

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活体穿刺取肝组织组织量会不会太少? 另外肝组织取出后要进行研磨,并加入淋巴细胞提取液进行提纯,以提高淋巴细胞得率,全程应于冰上操作,避免因操作不当引起的细胞死亡。
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dxy_0mxazdaw

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确定数量要结合流式和细胞计数板。功能要通过检测相关细胞因子的产生。
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