丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

瞬时转染目的病毒及空载病毒测OD值的问题

相关实验:外周血免疫细胞检测

user-title

丁香实验

目前我在做一个蛋白分子对细胞增殖影响,设计如下:

瞬时转染目的病毒及空载病毒48h后 96孔板加入10ul cck-8 1h后测OD值。

目前有几个问题不是很清楚:

1、GFP荧光对450nm处测的OD值是否有影响;
2、不同病毒转染程度本身是不是对OD值影响较大;
3、如何改变这种阴性对照组?

有做过MTT或者CCK8在瞬时转染下试验的望能指点一二

wx-share
分享

5 个回答

user-title

西柚味的芋圆

有帮助
肯定不会,,检测时的激发光的波长完全不一样,所以没有干扰
user-title

peaceful13

有帮助
GFP的发射波长为525左右~应该不会对405有影响~担心有影响的话可以采用双波长的读值来进行背景的排除~
user-title

颜渊溪桥

有帮助
GFP发射峰在488nm左右,对450吸光度没有影响;另外感染量也不会有影响,所以做了空白对照和感染空载的阴性对照即可。
user-title

dxy_0mxazdaw

有帮助
瞬时转染对于OD值应该没有任何影响,GFP也不会有影响!
user-title

txs900416

有帮助
gfp不会对cck8造成影响;不同病毒转染有差异;使用450nm吸光度-630nm吸光度可减小本底误差
提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序