瞬时转染目的病毒及空载病毒测OD值的问题
丁香实验
目前我在做一个蛋白分子对细胞增殖影响，设计如下：
瞬时转染目的病毒及空载病毒48h后 96孔板加入10ul cck-8 1h后测OD值。
目前有几个问题不是很清楚：
1、GFP荧光对450nm处测的OD值是否有影响；
2、不同病毒转染程度本身是不是对OD值影响较大；
3、如何改变这种阴性对照组？
有做过MTT或者CCK8在瞬时转染下试验的望能指点一二
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5 个回答
西柚味的芋圆
有帮助
肯定不会，，检测时的激发光的波长完全不一样，所以没有干扰
peaceful13
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GFP的发射波长为525左右～应该不会对405有影响～担心有影响的话可以采用双波长的读值来进行背景的排除～
颜渊溪桥
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GFP发射峰在488nm左右，对450吸光度没有影响；另外感染量也不会有影响，所以做了空白对照和感染空载的阴性对照即可。
dxy_0mxazdaw
有帮助
瞬时转染对于OD值应该没有任何影响，GFP也不会有影响！
txs900416
有帮助
gfp不会对cck8造成影响；不同病毒转染有差异；使用450nm吸光度-630nm吸光度可减小本底误差
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