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细胞冻存后复苏后的最佳接种浓度?

相关实验:细胞冻存和复苏实验

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吃不饱的猪

我冻存的细胞浓度大概是4X10^6/ml,平时我在传代时常用的接种浓度时5X10^5/ml,细胞长得不错。所以冻存后复苏后我的接种浓度也是用5X10^5/ml,但细胞长的不好。是我细胞没冻存好,还是接种浓度低了。我看有的资料说,复苏后传一瓶的,有传二瓶,也有三瓶,究竟多大的浓度比较适合呢?
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2 个回答

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fyydnz

有帮助
好久没做实验了,但把我依稀记得的细胞冻存复苏的心得说一下吧! 个人觉得没有统一的规定说一管冻存的细胞可以复苏几瓶。首先得看你当时冻存细胞的状态,数量等,要是“种子”不行的话,你后面再怎么复苏,细胞状态也不会好的!再者当复苏后,当离心去除冻存液之后,用培养基吹打开细胞后,可以用肉眼观察下大概细胞浓度,如果觉得细胞浓度很高,可以适当多接种几瓶,要是浓度很低的话,那就少接种,有个一瓶就够了。第三,接种后,培养基内可以多加些血清。因为冻存过程中或多或少都是对细胞有损伤的,血清适量多一点,“土壤”肥沃多一点,“种子”就容易发芽!第四,复苏后观察细胞状态,但只要在传代之前,尽量不要动细胞,细胞贴壁生长后,会自身分泌生长因子,进而促进细胞生长,如此循环,要是不停的动细胞的话,会影响细胞生长!!以上是我和我的师兄培养细胞总结的一些心得!!呵呵,希望对你有帮助!!
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琴琴小贝

有帮助
这个要根据不同的细胞特性而定。
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