好久没做实验了,但把我依稀记得的细胞冻存复苏的心得说一下吧! 个人觉得没有统一的规定说一管冻存的细胞可以复苏几瓶。首先得看你当时冻存细胞的状态,数量等,要是“种子”不行的话,你后面再怎么复苏,细胞状态也不会好的!再者当复苏后,当离心去除冻存液之后,用培养基吹打开细胞后,可以用肉眼观察下大概细胞浓度,如果觉得细胞浓度很高,可以适当多接种几瓶,要是浓度很低的话,那就少接种,有个一瓶就够了。第三,接种后,培养基内可以多加些血清。因为冻存过程中或多或少都是对细胞有损伤的,血清适量多一点,“土壤”肥沃多一点,“种子”就容易发芽!第四,复苏后观察细胞状态,但只要在传代之前,尽量不要动细胞,细胞贴壁生长后,会自身分泌生长因子,进而促进细胞生长,如此循环,要是不停的动细胞的话,会影响细胞生长!!以上是我和我的师兄培养细胞总结的一些心得!!呵呵,希望对你有帮助!!