细胞复苏时如何换液呢？

我觉得其实细胞换液和植物换水差不多

冻存细胞取出后37℃速溶，取15ml离心管，加入10ml含血清培养基，将冻存管中液体（通常1.5ml）也加入离心管中，习惯轻吹几下混匀，1200转常温离心5min，去掉上清，加入5ml含血清培养基，轻吹制成细胞悬液，加入到培养瓶中，即可。注意，新复苏的细胞不要经常去看去动。 换液的话，只要把培养基吸出，再加入新的培养基就可以了。如果你复苏的细胞长得很不均匀，可以胰酶消化下来再混匀后在重新加进去（像正常细胞一样做）

个人觉得这个和细胞本身有关可以离心，也可以不离心，贴壁细胞我一般喜欢加到细胞冻存也10倍体积培养基，待细胞贴壁，大概也就是12小时以后换下新培养基就OK了，悬浮细胞只能离心复数，如果贴壁细胞对DMSO敏感的话，那就像悬浮细胞一样离心后加新培养基。

复苏后先补充培养基稀释DMSO，然后离心，去清液。补充培养基后待细胞稳定24小时，再更换培养基一次

可以等细胞贴壁之后，用吸管把培养基吸出来，然后换成新鲜的。关于细胞培养的，来邦网也有一些，可以作为参考

我一般都选择先离心，然后弃去培养液，即去除DMSO，加入新鲜培养液后接种于培养瓶或培养皿中

本实验室均采用第一种，因为离心导致细胞破碎说明细胞状态已经不好了，不如早点除去。DMSO对细胞有毒性，可能导致细胞变异等。

neurotech二个方案我都用过，个人觉得还是第一种方案比较好，第一次复苏我用的第二种方案，结果我养的悬浮细胞全部贴壁生长了，一周前又用第一种方案复苏了两株细胞，现在细胞状态还不错。真心觉得DMSO不能留。

neurotech老兄说的第二个方案我用过，除非你的细胞很皮实，否则很容易让细胞在这24h内状态变差。不差那离心的几分钟，与重新复苏比起来，这点时间算占便宜了。

两种方案可供选择： 一、复苏时，行离心，弃上清后，种入瓶中。主要目的是防止DMSO对细胞造成损害，但刚复苏的细胞教脆弱，离心易导致细胞破碎。 二、复苏时，直接将冻存管里的液体倒入培养瓶中，另外添加适量的培养基，孵箱24h，待贴壁后行常规换液。省去了离心一步，避免离心时细胞破裂。但DMSO未能去除，长时间培养可能会对细胞有损害。 个人觉得第二种方案较方便。