请问有没有做发酵酒试验的？非酿酒酵母具体接种方法？

在 YPDA 固体培养基上挑取非酿酒酵母菌株接种于 YPD 液体培养基中，于 28℃、170r/min 条件下培养 24 h 制成种子液。

将各酵母种子液以 1% 的接种量接种于 YPD 液体和 MSM 培养基中，28℃ 条件下培养, 每隔 2 h 取 200L 菌液于 96 孔板中，使用 BiotekSynergyHTX 多功能微孔板检测仪在 600nm 波长处测定菌悬液的 OD 值, 每个样品重复测定 3 次。然后根据时间和 OD 值绘制生长曲线。

将各非酿酒酵母种子液以 1% 的接种量接种于 MSM 培养基中, 并于 28℃ 培养 14d 得到酵酒样，每个样品设 3 个重复。

酒样的挥发性化合物采用顶空固相微萃取一气质联用技术测定。香气化合物使用配带有 PAL 自动进样器的 7890B/ 5977A 气相色谱法质谱联用仪检测，选择 DB-WAX 毛细管色谱柱，顶空固相微萃取进样，20 mL 顶空瓶中加入 2 g 氯化钠，8 mL 样品以及 2OL 内标 (4-甲基-2-戊醇,浓度2.000g/L)，45℃ 预热顶空瓶 10 min, 萃取头萃取顶空瓶液面上方气体 45 min，萃取过程顶空瓶在 Agitator 中不停摇动, 萃取头在进样口 250℃ 解析 10 min，采用不分流模式进样, 恒流模式, 柱流量 0.8 mL/min，程序升温, 初始温度 40℃, 以 1～C/min 升到 45℃, 保持 2 min, 以 3℃/rain 升到 84℃, 保持 2 min，以 3℃/rain 升到 120℃, 保持 3 min, 以 3qC/min 升到 200℃, 以 5℃/min 升到 230℃, 运行时间 71.667rain，MSD 传输线 250℃，质谱选择 SCAN 模式进行扫描。

用 GC—MS 内置比色谱库 NISTI4 检索匹配，并结合保留指数定性，用内标法定量。

接种方法:将新鲜刺梨榨汁，调整其p H为3.5,糖度为24°Bx。将非酿酒酵母F13和酿酒酵母X16种子液以1:1比例混合接种于刺梨汁中,使其菌株终浓度为108CFU/mL。25 ℃恒温静置发酵,以糖度不再降低，酒精度不再增加判定发酵终点。以X16单独发酵作为对照每个样本3个平行重复。发酵结束后，取刺梨果酒4℃、3000 r/min离心5min去残渣，上清液用于后续分析。

在冷浸过程中，非酿酒酵母的数量在104–105 CFU/mL范围，酒精发酵开始时，非酿酒酵母的数量到达最大，为106–107 CFU/mL，随着酒精发酵数量下降，酒精发酵结束时非酿酒酵母的数量在103–104 CFU/ mL