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可以尝试一下在梯度蔗糖溶液中浸泡
土井挞克树
需要制作沉糖梯度的:
在离心管中依次加入蔗糖水溶液,浓度由低到高,比如10%、20%、30%、40%等,每层梯度之间要用100%的PBS缓冲液分隔。进行离心:将样品加入制备好的梯度管中,离心速度一般为1000-2000 g,离心时间约30-60分钟,离心后会形成不同密度的沉淀带。取出沉淀带:使用移液器或者毛细管从不同密度的沉淀带中取出不同类型的细胞或亚细胞结构。
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如果组织在经过48小时在4°C的30%蔗糖溶液中浸泡后仍无法沉淀,可能有以下几种情况和处理方法:
1. 密度梯度不够:蔗糖浓度和梯度可能不足以使组织沉淀下来。你可以尝试增加蔗糖浓度或调整密度梯度以增加组织的沉降速度。请确保准确地制备蔗糖梯度溶液,并根据具体实验要求调整浓度。
2. 组织太轻或过于浮动:某些类型的组织可能本身比较轻或浮动性较高,使其难以沉淀下来。在这种情况下,你可以尝试增加浸泡时间,或尝试使用其他的沉淀方法,如离心或筛选等。
3. 组织破碎或分散:如果组织在处理过程中破碎或分散,可能导致无法形成明显的沉淀。请确保在组织处理过程中小心操作,避免组织破碎或分散。
4. 组织不适合蔗糖沉淀:某些特定类型的组织可能不适合使用蔗糖沉淀方法。在这种情况下,你可以尝试其他组织分离和纯化的方法,如离心、筛选、离子交换层析等。
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