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求教给受精卵转染,质粒怎么设计

相关实验:帕金森病动物模型

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残兵

求教大佬,给斑马鱼受精卵转GFP,能够稳定遗传,应该用哪种质粒

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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

以下是选择质粒时的一些建议:

1. GFP基因:选择一个经过验证的GFP基因,确保它在斑马鱼中能够高效表达。常用的GFP基因包括GFPmut2、EGFP等。

2. 启动子:选择一个适合斑马鱼的启动子,以确保GFP基因在受精卵中被高效表达。常用的启动子包括cmv(人细胞病毒即CMV的即刻启动子)、促性腺激素释放激素(GnRH)启动子等。

3. 终止子:选择一个适当的终止子,以确保GFP基因的表达在正确的位置终止。常用的终止子包括β-球蛋白终止子等。

4. 背景标记:除了GFP基因外,还可以选择一个背景标记基因,例如RFP(红色荧光蛋白基因),以便标记转基因斑马鱼。

5. 载体稳定性:确保选择具有高稳定性的质粒,以保证转基因斑马鱼的遗传稳定性。某些质粒可能包含稳定复制元件或选择标记(例如抗生素抗性基因),以确保质粒在后代中得以保持。

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于小鱼鱼1998

有帮助

可以用细菌质粒,也可以用脂质体质粒。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

受精卵转染一般选择脂质体转染质粒,可以请质粒公司设计

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