载体与片段同源重组酶连接不上
Wuli牛牛
载体体和目标片段同源重组连接不上，热激法转DH5α涂板，长出来都是假阳性，载体与片段比例3：1、4：1做过好几次，都不行，要么假阳性，要么直接一个菌落都不长～好郁闷
2 个回答
申东熙老伯
有帮助
是不是热激法热激的太久，菌死掉了。
Wuli牛牛
热激90s
土井挞克树
有帮助
碰到难连的片段，首先考虑引物设计问题，载体线性化成功与否，片段与载体比例是否恰当（一般3：1）
Wuli牛牛
好的 谢谢解答～
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