明胶酶谱

有没有跑明胶酶谱的大神，实验磕了三周了 还是没有一点效果。

没有一点条带，可能导致灭活事项都有注意，制样不加DTT、贝塔-me，不加热

4℃冷库电泳，12%的胶跑10mA的电流

复性

用的是2.5% 的Triton X-100清洗4℃ 摇床 30min/2次

孵育

先用孵育液（20mM Tris-Hcl pH7.5 10毫摩尔氯化钙 1微摩尔氯化锌）室温摇床15min

在加新的孵育液37℃ 18h

染色用考马斯R-250的染液染色40min

大致流程是这样

还有那些注意事项 望大神指点