求，分子量在91kd的电泳和转膜条件!

建议分别用两个海绵夹转，然后跑的时候可以分别配两种不用的胶，1%的胶和1.5%的胶，91KD的话，可以用120V电泳100分钟左右，250mA转膜转2个小时左右

有以下建议:

1. 37kDa和90kDa蛋白同时转膜,以1kDa对应1分钟的原则基本合理。

2. 但是中间取出小蛋白膜可能会影响最后结果,原因有:

(1) 转膜系统再次组装可能影响转膜均匀性。

(2) 去除小蛋白膜会改变大蛋白膜的转移电流,导致不足。

3. 所以最好不要中断转膜系统,一次性转膜完成,这对两种大小蛋白都好。

4. 如果中断操作,最后大蛋白未能转出,需要增加转膜总时间或电流。

5. 也可以先转小蛋白足够时间,然后加入大蛋白继续转,但要注意系统稳定。

6. 重复试验,对照单次转膜和中断转膜结果,确定最佳方案。

建议:

孔径:0.22NC

转膜方式(恒压、恒流):湿转 恒流 300 mA

转膜时间:120 min