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以下是一般的步骤概述,供您参考:
1. 准备外泌体:收集您感兴趣的细胞系或生物样本,并进行外泌体的分离和纯化。这可以使用不同的方法,如超速离心、尺寸排除层析或商用试剂盒。
2. DiR染色:将分离得到的外泌体与DiR染料进行共孵育。DiR是一种近红外发光的染料,可以被外泌体摄取。
3. 清洗和纯化:通过洗涤和离心等步骤,去除未结合的DiR染料,以确保外泌体的纯度。
4. 活体成像:使用近红外光学成像设备(如荧光显微镜、近红外光谱成像仪等),将DiR标记的外泌体注入到活体动物体内。您可以选择注射到血液循环中、腹腔或其他特定位置。
5. 图像采集和分析:利用成像设备捕获外泌体的近红外发光信号,并进行图像分析以获得定量数据。您可以根据需要选择时间点和成像深度。
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