土井挞克树
一般灭活需要10min,重复三次。
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内源性过氧化物酶是一类催化细胞内过氧化氢分解反应的酶,其灭活时间和浓度会因各种因素而异,如温度、pH值、抑制剂等。
一般来说,在常规细胞培养的条件下,内源性过氧化物酶的灭活时间为几分钟至几十分钟之间,且受到温度的影响比较大。一般情况下,内源性过氧化物酶的活性会在50℃左右快速降低,到60℃时,其活性会完全消失。
内源性过氧化物酶的浓度在不同细胞类型和状态下也会有所不同,一般来说,正常细胞内内源性过氧化物酶的浓度较低,而在某些疾病或病理状态下,如炎症、氧化应激等,内源性过氧化物酶的表达会增加。
需要注意的是,内源性过氧化物酶的灭活时间和浓度具有一定的差异性,其灭活时间和浓度的测定需要根据具体实验条件和细胞类型进行优化和确定。
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灭活内源性POD一般3%过氧化氢灭活时间短点,可以10min左右,而0.3%过氧化氢则可以适当延长封闭时间,一般10~30min;用甲醇配置过氧化氢比双蒸水或PBS可能好在保护抗原和固定组织作用,过氧化氢孵育时间过长易引起脱片;现用现配,配好后4度避光保存。
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