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THP1 细胞上流式 未分化的细胞表面抗原表达量特别高

相关实验:流式细胞仪标本制备

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dxy_ia6hynt5

不明白到底是为什么!!!有大神可以帮忙讲解下嘛

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3 个回答

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dxyc42u

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这个急性髓系白血病细胞里面含有太多原始细胞

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loveliufudan

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如果您的实验是在THP1细胞分化前进行的,那么未分化的THP1细胞表面抗原的表达量可能比已分化的THP1巨噬细胞更高。这也可能是您观察到THP1细胞上流式未分化细胞表面抗原表达量特别高的原因之一。

此外,THP1细胞的上流式细胞表面抗原表达也可能受到其他因素的影响,例如细胞培养的条件(包括温度、CO2浓度、培养基配方等)、处理方式(例如细胞收集和染色前的酶处理)、抗体的特异性和浓度等。

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huarenqiang5

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建议从以下几点找一下原因:

1.细胞株的来源很重要。


2. 注意细胞的密度一定要高,介于5×10^5—— 10^6/mL之间,增值的快。


3. THP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长,对培养基变化非常敏感,所以 尽量使用相同Ph的1640。


4. 传代后切忌常移出培养箱观察,否则会影响细胞生长,状态变差,一般首先表现为细胞内颗粒变多。一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3~4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,一般2-3次换液离心一次(只是补充培养基)3) 使用1640(ATCC推荐),注意加碳酸氢钠2.5g就可以了,宁酸勿碱; 4)注意冻存的时候密度大些,推荐用血清冻存。

5.建议开始用小瓶,不要用一次性的。



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