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流式与werstern的区别?

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丁香实验

流式与werstern的区别?

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13 个回答

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莹啊免疫啊

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WB比较适合做胞内吧,流式一般做的都是胞外。
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dxy_29k93ve4

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流式检测蛋白表达一般比较快能拿到结果而且所需要的细胞数比WB会少很多,较低比例的细胞也可以检测但是WB需要把细胞分选足够才能检测出蛋白水平,而且流式通道多,可以一次实验检测好几种蛋白分子表达水平或者有没有共同表达情况,但是流式抗体相比WB抗体贵不少,而且流式检测需要提前做好检测模板和阴性对照,不然会影响实验结果准确性
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马小羊

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要讲区别太多太多,先讲一点共同点,本质上都是蛋白水平的检测。 主要的区别你可以想想这样一种情形,给你一个脾脏细胞悬液,想看脾脏细胞中的B细胞中x分子表达水平的改变,wb怎么办?也要先流式分选出b细胞,才能再wb检测。而流式可以同时标记b细胞marker以及x分子,这样在圈出b细胞群以后直接看x分子标记的应该强度就可以了。所以主要区别可以说是wb只能鉴定“总体”水平,而流式可以做到细分。当然流式也分分析和分选,现在还有了质谱流式、流式结合荧光显微成像等等越来越强大的功能。
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CXCR3

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流式和WB都可以检测细胞蛋白的表达,流式是通过荧光标记以及激发光激发来检测蛋白表达,所呈现的也是荧光值。流式可以同时标记很多外标抗体。WB是通过定量的方法检测蛋白表达,检测比较有限。
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西柚味的芋圆

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流式相对wb要快速很多,是比wb 更新一点的技术。我们组俩种技术都做的很多。wb一般检测胞内和磷酸化的蛋白变化比流式简单,直观,性价比高,毕竟胞内因子的检测用流式测太折磨人了。我真的,每次破膜完,就没几个细胞,心态要崩。做表面的蛋白,流式出图快,结果好看
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txs900416

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流式是检测每个细胞的每个分子的表达量,western是群体检测。其余的没有什么不同,最简单的例子,一群混杂的细胞想看一个指标,流式可以通过多个染色标记出目的细胞亚群再看具体分子,wb只能分选出纯的细胞提蛋白才能鉴定
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咸水鱼rain

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流式是通过荧光抗体进行检测,WB是蛋白裂解后跑电泳分离大小不同的蛋白后进行检测,流式一次可以检测十几种表面分分子,而WB只能检测对应的蛋白,可以根据抗体的使用方法选择流式检测还是WB
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dxy_pcbxza64

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单个细胞荧光与群体荧光; 流式可以达到单细胞高通量; western的优势是对于表达量较低的蛋白检测效果较好;
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sk1981521

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1、Western 是检测蛋白表达的金标准,可用于检测细胞多种类型的蛋白;流式细胞术的方法多用于检测细胞膜蛋白,虽然也可通过Triton-X100给细胞打孔的方法来检测胞内蛋白,但对于分泌蛋白却是无能为力的; 2、Western测蛋白含量对抗体的量需要很少,一般1:1000左右,而流式对抗体的需要量很大,一般1:50(很浪费抗体); 3、采用Western方法检测细胞蛋白含量的变化一般要有内参,而流式一般要把每个样品分为两份,同时都做只加二抗(FITC标记的)的对照,这样平均到每个细胞的发光就不用内参了
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peaceful13

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流式检测的是天然的蛋白表达,可以进行定量或者定性分析,而WB一般检测的是变性蛋白的表达
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颜渊溪桥

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首先都是看蛋白表达量或修饰量的,但是两种方法对抗体的要求不同,WB能较好反应处理后细胞的平均变化情况,流式能告诉你细胞是不是分群了,是否只有一部分细胞变了,据此可以进一步分析。
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空山流水Hz

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1.方法原理不同。流式是检测完整细胞的蛋白表达。比如检测细胞胞膜表面蛋白,胞内蛋白。细胞是完整的,有时候需要打孔。而WB是要破碎细胞提取其蛋白。 2.仪器不同。 3.操作不同。
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dxy_0mxazdaw

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流式是通过荧光染色对分子表达进行定性及定量分析。Western是通过化学发光对蛋白进行定性及定量分析,原理是不同的。
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