z月亮不睡我不睡
大家好,我想请问一下我做凝集素印迹需要购买荧光标记物,但是我不知道该如何选择😭😭,我学校里只有一台应该奥德赛的荧光扫膜仪,有两个通道,分别是(1:激发685nm,发射720nm,2:激发785nm,发射820nm)。那么我是选择在对应通道内可以扫描的荧光标记物即可吗?因为做这个凝集素印迹用的比较多的荧光标记物是青色素Cy系列,但是常用的Cy3或者Cy5标记物我这个仪器又扫不了。我想知道荧光标记物可以根据通道来更换吗?就不选择这个青色素系列现在比较纠结的是这个😣。希望有同道可以多多指导。谢谢!!!
sswei
荧光标记物可以根据通道来更换。
huarenqiang5
你可以根据下表荧光标志物的激发光和发射光波长进行参考选择:
loveliufudan
根据你提供的奥德赛荧光扫描仪的两个通道参数来看,我的建议是:
1. 通道1(685nm激发/720nm发射):适合选择DyLight 680等红色荧光素,峰值emission在700-720nm范围内。
2. 通道2(785nm激发/820nm发射):适合选择DyLight 800等远红荧光素,峰值emission在810-830nm范围内。
3. Cy3和Cy5不适合此仪器,峰值emission分别约565nm和670nm,不在通道范围内。
4. 也可以考虑Alexa Fluor 680(A680)和Alexa Fluor 790(A790), emission范围分别是约700nm和795nm,可以检测。
5. 选择时还要考虑荧光强度、稳定性等指标,进行比较选用。
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